柯勒照明的建立与检查：换一次物镜就要重做的一次

柯勒照明的建立与检查：换一次物镜就要重做的一次

图像发灰、分辨率上不去、视野亮度不均，追到最后常常是照明没有建立好。柯勒照明不是把光调亮，而是让光源成像在正确的平面上。换物镜、换聚光镜或换灯泡之后都需要重做。

一、柯勒照明要解决什么

它决定的是视场亮度是否均匀、分辨率与对比度能否达到物镜应有的水平。

• 光源的发光面成像在聚光镜孔径光阑平面上，而不是成像在样品上；
• 视场光阑成像在样品平面上，其边缘与视场边缘重合；
• 建立成功后视场亮度均匀、看不到灯丝像与热点，分辨率与对比度同时改善；
• 更换物镜、更换聚光镜或移动过聚光镜之后都需要重新建立；

二、建立步骤

按顺序做，顺序错了会反复返工，这也是很多人觉得「调不好」的原因。

• 先用低倍物镜对焦样品，把视场光阑缩到最小，看清它的边缘像；
• 调节聚光镜高度，使视场光阑的边缘像清晰地成像在样品平面上；
• 用聚光镜对中螺钉把光阑像移到视场正中，再把视场光阑开到刚好超出视场；
• 调节孔径光阑到与物镜数值孔径相匹配的开口，兼顾分辨率与对比度；

三、常见错误

这些做法看起来「有效果」，实际上是在牺牲分辨率换观感。

• 把孔径光阑当亮度旋钮一味关小，会造成分辨率下降与衍射伪影；
• 视场光阑开得过大引入杂散光，表现为对比度下降、背景发灰；
• 只用高倍物镜调照明，低倍下照明不均的问题被掩盖；
• 换上相差、微分干涉或暗场附件后未重新核对，光路条件已经改变；

四、检查与记录

把状态固化下来，下次「变暗变糊」时才有对比依据。

• 用均匀样品或空白视野检查亮度是否均匀、有无热点；
• 记录每支常用物镜对应的孔径光阑位置，便于快速复原；
• 更换灯泡或光源后重做一次，光源位置变化会直接影响照明状态；
• 拍一张标准视野图存档，之后出现异常时与该图直接对比；

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